自新冠肺炎疫情發(fā)生以來，全世界都在關(guān)注新冠肺炎的相關(guān)知識(shí)，尤其是防治措施，科研人員與醫(yī)護(hù)人員全力研究新型冠狀病毒（COVID-19，以下簡稱新冠病毒）的檢測診斷及其防治措施。COVID-19是一種RNA病毒，其RNA有自我復(fù)制和逆轉(zhuǎn)錄兩種復(fù)制方式。病毒在復(fù)制過程中容易發(fā)生變異，這是RNA病毒的一個(gè)共性，如原本為低致病性禽流感病毒株（H5N2、H7N7、H9N2），可經(jīng)6~9個(gè)月禽間流行迅速變異而成為高致病性毒株（H5N1），這給有效疫苗的研制增加了困難。為了減少病毒的散播，更好地控制傳染源，需盡早確診感染者，病原學(xué)檢測成為患者確診的主要依據(jù)之一，而病毒核酸檢測是病原學(xué)檢查的快速診斷方法。
臨床常用的核酸檢測技術(shù)主要有常規(guī)PCR、套式PCR、實(shí)時(shí)熒光PCR和等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等。新冠病毒是通過特定細(xì)胞表面的受體入侵細(xì)胞造成感染，并利用宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制增殖，引起宿主發(fā)病。病毒核酸檢測的原理，即根據(jù)病毒堿基尋找區(qū)別于其他病毒的核酸序列，由此設(shè)計(jì)引物或探針，實(shí)現(xiàn)核酸序列的“靶向匹配”；再通過細(xì)胞裂解液，提取病毒核酸，實(shí)時(shí)熒光RT-PCR擴(kuò)增40次循環(huán)以上，使其核酸數(shù)量可達(dá)到足夠通過熒光等常規(guī)方法進(jìn)行檢測。其中最關(guān)鍵的就是引物和探針的設(shè)計(jì)，使之與該病毒核酸特定區(qū)域高度匹配，即特異性很強(qiáng)，一旦待檢標(biāo)本PCR擴(kuò)增結(jié)果為陽性，則證明該標(biāo)本中存在該病毒核酸。我國頒布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第七版）》中明確指出，鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、糞便等標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸為陽性，可作為新冠病毒肺炎的病原學(xué)診斷之一，而且下呼吸道標(biāo)本（痰或氣道抽取物）更加準(zhǔn)確。但在疫病發(fā)生初期有人報(bào)道稱，新冠肺炎患者中核酸檢測的陽性率約為30-50%；而鐘南山院士發(fā)布的近1100例新冠肺炎患者臨床數(shù)據(jù)CT檢查顯示，76.4%的患者呈現(xiàn)了肺炎表現(xiàn)，主要為毛玻璃樣陰影（50%）和雙肺斑片狀陰影（46.4%），絕大多數(shù)重癥患者都能以此確診?？梢?，核酸檢測不能作為確診感染的唯一手段，需要結(jié)合患者的臨床癥狀和臨床影像學(xué)檢測綜合分析。由此，我們需要進(jìn)行思考，樣本的新冠病毒核酸檢測為什么陽性率不高呢？這就需要客觀地分析疾病的發(fā)展過程、樣本采集、樣本的保存和運(yùn)輸、核酸的提取、擴(kuò)增體系以及人員操作等諸多方面的因素，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室檢測不能離開臨床癥狀資料的分析。
根據(jù)深圳市第三人民醫(yī)院（南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院）國家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心的人員對來自213 名COVID-19 確診病例的866 份樣本檢測結(jié)果進(jìn)行的分析，結(jié)果顯示，發(fā)病后0~7 天采集的痰液、鼻拭子、咽拭子三種類型樣本中，核酸檢測陽性率僅為60%；而且隨著病程發(fā)展三種類型樣本陽性率均有所降低。表明新冠肺炎患者不同的病理時(shí)期機(jī)體內(nèi)存在的病毒量不同，不同患者個(gè)體病毒存在的主要部位不同，雖然都出現(xiàn)病毒感染，但在相關(guān)的部位采集的病毒量較少或根本采集不到病毒，以至于通過實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法檢測不到。如禽流感的潛伏期從數(shù)小時(shí)到數(shù)天，最長可達(dá)21天，臨床檢測采集樣本時(shí)需采集早期感染的樣本。任何疫病都有一定的潛伏期，不同的個(gè)體潛伏期長短不一，潛伏期的長短受多種因素的影響，如病毒的毒力、感染的病毒量、患者的大小和品種、營養(yǎng)狀況、環(huán)境及應(yīng)激因素等。有的在采樣時(shí)感染可能發(fā)生數(shù)天或數(shù)周，不能確定標(biāo)本采集時(shí)是否是樣本采集的最佳時(shí)期。此外，在感染早期臨床癥狀不典型，或病毒復(fù)制數(shù)量達(dá)不到qRT-PCR檢測的閾值，所以這些都不可避免會(huì)出現(xiàn)無法檢出的現(xiàn)象。因此，在出現(xiàn)疑似病例，尤其是疫病高發(fā)地區(qū)、流行區(qū)要連續(xù)采集樣本，多次檢測，結(jié)合臨床癥狀綜合分析檢測結(jié)果。因此臨床上，任何疫病的確診都不能僅靠病原學(xué)檢測1次陰性結(jié)果就做出疾病排除性診斷。由此我們設(shè)想，如果發(fā)病動(dòng)物經(jīng)初步診斷可能是病毒性感染，須在動(dòng)物發(fā)病的初期或急性期進(jìn)行樣品的采集，否則機(jī)體的免疫系統(tǒng)會(huì)吞噬病毒，導(dǎo)致病毒數(shù)量減少甚至消失，不易檢出，而且臨床上病毒感染的晚期極易繼發(fā)細(xì)菌性感染，從而增加檢測判斷的干擾。獸醫(yī)臨床檢測動(dòng)物活體采樣時(shí)，一定要選擇有典型病癥而且未經(jīng)治療的病例，這樣可以獲得動(dòng)物傳染病的基本信息，同樣這對細(xì)菌學(xué)的檢測也是至關(guān)重要的。對于群體性感染發(fā)病的情況，至少要選擇5個(gè)動(dòng)物進(jìn)行樣本的采集，每個(gè)動(dòng)物的樣品材料要有足夠的數(shù)量，這樣不僅要保證本次的檢測順利，也要為復(fù)檢準(zhǔn)備充足的樣品。要想提高核酸陽性檢出率，首先要保證樣本采集部位的準(zhǔn)確性。新冠肺炎患者臨床癥狀主要表現(xiàn)發(fā)熱、干咳、乏力，有些伴有鼻塞、流涕、咽痛、肌痛和腹瀉等。針對新冠病毒檢測的采集，國家衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第五版）》中指出，鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、糞便等標(biāo)本中可檢測出新型冠狀病毒核酸，第六版的指南建議采集痰標(biāo)本，而在第七版提出下呼吸道標(biāo)本（痰或氣道抽取物）最準(zhǔn)確。但臨床病例個(gè)體情況差異較大，有的患者無痰，有的下呼吸道的肺泡灌洗液標(biāo)本采集不便，導(dǎo)致上呼吸道采集的樣本病毒含量低或不含病毒，致使檢測結(jié)果差異較大。由此可見，獸醫(yī)臨床上我們要對患病動(dòng)物的典型部位進(jìn)行采樣，或者同一患畜多部位采集且合并采集樣本進(jìn)行檢測。在采樣前對患病動(dòng)物進(jìn)行初步診斷，需選擇病原體含量較高的部位進(jìn)行采集，如呼吸道癥狀明顯的采集鼻咽拭子、口咽拭子，然后放同一采集管中；如有消化道癥狀的同時(shí)采集糞便或肛拭子進(jìn)行混合保存，然后取混合樣進(jìn)行檢測。對確診為細(xì)菌病的動(dòng)物要注意其血液、尿液、膿汁、分泌物、糞便及腫脹局部組織的滲出液等材料的采集。對于病死畜，需要盡量在無菌條件下采集具有典型病變的器官和組織，以及病原含量較高的臟器或內(nèi)容物，若需要做病理切片，采集的組織最好在病健結(jié)合部。在采集臟器時(shí)需注意，一定要保留其被膜或完整的結(jié)構(gòu)，如腎臟要有髄質(zhì)部等。此外，無論何種疫病病死畜，體內(nèi)的淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎有無病變，通常都一并采集。采集人員的操作規(guī)范程度同樣影響樣本的質(zhì)量及檢出率，比如新冠肺炎疑似病例患者鼻咽拭子采樣時(shí)，要求“三個(gè)要”，即要深、要轉(zhuǎn)、要取細(xì)胞?！耙睢奔淳嚯x從耳垂到鼻尖長度的一半，“要轉(zhuǎn)”即轉(zhuǎn)動(dòng)10~15s，轉(zhuǎn)動(dòng)4~5圈，“要取細(xì)胞”即取到鼻咽部的細(xì)胞，否則無法保證樣本的質(zhì)量。假如鼻咽拭子采樣困難，可考慮口咽拭子采樣，此時(shí)要注意用拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁3~5次。然后將拭子頭浸入含3ml病毒保存液管中，尾部折斷棄去，立即旋緊管蓋。獸醫(yī)臨床檢測時(shí)，除了一些拭子采樣，我們還會(huì)有組織、血液、尿液等樣品的采集。無論哪種采集方法和樣品，都要規(guī)范性操作，需盡量保障無菌的條件，特別是用于微生物學(xué)的檢查，須采集到含有病毒的細(xì)胞和含有細(xì)菌的組織等，而且病毒的含量要達(dá)到核酸的檢測下限。采集后的患畜部位和采樣用的器械及盛放容器需進(jìn)行滅菌處理，避免樣品被污染，確保核酸檢測的準(zhǔn)確性。在規(guī)范采集方法和保證樣品質(zhì)量的前提下，還要做好個(gè)人的安全防護(hù)。因?yàn)椴杉臉悠泛泻芏嗟牟淮_定因素，我們盡量按照高一級(jí)級(jí)別的個(gè)人防護(hù)，確保個(gè)人的人身安全。采樣時(shí)如果發(fā)現(xiàn)動(dòng)物急性死亡，不要隨意剖檢，需進(jìn)行血涂片的鏡檢，確定不是人畜共患的高致病微生物感染，如炭疽等，之后方可進(jìn)行解剖采樣。采樣結(jié)束后還要對尸體、場地及采樣人員進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散。4、樣本的保存和運(yùn)輸方法不當(dāng)正確的保存樣品，使病料新鮮或接近新鮮的狀態(tài)，是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的前提條件。臨床采集的樣本會(huì)受環(huán)境因素、試劑、保存管等因素的影響，導(dǎo)致細(xì)胞破碎釋放出內(nèi)源性RNA酶，病毒RNA在空氣中也很容易降解，從而影響我們最后的檢出效率。原則上，樣本采集后最好放在防病毒核酸降解的標(biāo)本采集管中，且及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室，盡快完成檢測。標(biāo)本在室溫下存放時(shí)間過長，容易引起核酸的降解，致使檢測結(jié)果不能呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。因此，建議樣本采集后室溫存放不超過2~4h，2~8℃條件下不超過72h，如果不能及時(shí)檢測需要放在-70℃以下進(jìn)行保存。同樣，在獸醫(yī)臨床上對于發(fā)病動(dòng)物的采樣，尤其是采集樣本比較多時(shí)，或者是夏季采樣，一定要盡快完成，爭取在4h內(nèi)完成，對于病死動(dòng)物需立即采集，否則會(huì)出現(xiàn)組織器官的腐敗、變質(zhì)或變性等現(xiàn)象，這將嚴(yán)重影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。針對不同檢測用途的樣品有不同的保存方法，其中血清學(xué)檢測，一般采集的血液立即置于無菌試管中密封，室溫放置1h或37℃ 30min，之后進(jìn)行冷藏保存，需較長時(shí)間轉(zhuǎn)移時(shí)要加入適當(dāng)?shù)目股?；病毒學(xué)檢測需要使用含有甘油的保存液低溫保存。樣本轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)要嚴(yán)格遵守國家對感染性物質(zhì)的運(yùn)輸要求進(jìn)行包裝和運(yùn)送，須在專用的轉(zhuǎn)移箱中運(yùn)送，不要與其他物品混雜。防止病料的外漏，根據(jù)檢測目的以最快最直接的途徑送往檢測實(shí)驗(yàn)室。另外，對于轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器使用前后及時(shí)用 75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。對于感染性物質(zhì)的檢測，如新冠病毒，在處理前先進(jìn)行病毒滅活，如56~60℃孵育30min，或用試劑盒自帶的采樣液滅活病毒。獸醫(yī)臨床上，很多采集的病料其傳染性也很難估計(jì)，因此最好是滅活后再進(jìn)行檢測，但是，要注意滅活的條件，避免病毒的核酸降解。目前，常用的核酸提取方式有兩種，即手工提取和核酸全自動(dòng)提取儀提取。手工提取過程復(fù)雜，步驟繁多，容易交叉污染，而且操作人員掌握的分子生物學(xué)知識(shí)和操作技能的熟練程度差異較大，很難做到統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)化，而全自動(dòng)核酸提取儀操作可以避免個(gè)人手工操作的差異，易于標(biāo)準(zhǔn)化，但在提取過程中可能產(chǎn)生氣溶膠，進(jìn)而交叉感染出現(xiàn)“假陽性”現(xiàn)象，同時(shí)不同的提取試劑對最后提取到的核酸數(shù)量和質(zhì)量也可能存在差異。因此，提取的核酸數(shù)量和質(zhì)量的不同，對將來的核酸擴(kuò)增至關(guān)重要，直接會(huì)影響最后的檢測結(jié)果。臨床上通過核酸進(jìn)行病原學(xué)的檢測，如果采用手工方法提取，一定要嚴(yán)格規(guī)范操作過程，使用全自動(dòng)核酸提取儀提取，在每次提取后要對提取儀噴灑核酸清除劑，然后用紙擦拭干凈，最后用75%酒精噴灑擦拭（磁棒除外），紫外燈再至少照射半小時(shí)，來最大程度的減少核酸提取過程的污染，提高提取核酸的數(shù)量和質(zhì)量，充分保證檢測的準(zhǔn)確性、可靠性。因此，核酸提取的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)的培訓(xùn)，具備基本的分子生物學(xué)的相關(guān)知識(shí)和熟練的操作技能，儀器的規(guī)范使用等，避免人員因素和儀器因素對檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。7、核酸擴(kuò)增體系和質(zhì)控的設(shè)置差異核酸擴(kuò)增體系一般采用國家標(biāo)準(zhǔn)推薦的反應(yīng)體系和試劑，為了降低加樣的影響，可適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體系，如采用40μl或50μl的反應(yīng)體系，或通過實(shí)驗(yàn)摸索適合本實(shí)驗(yàn)室檢測的合適的反應(yīng)體系。另外，每批次擴(kuò)增建議設(shè)置一個(gè)弱陽性質(zhì)控和三個(gè)陰性質(zhì)控，且三個(gè)陰性質(zhì)控的位置要隨機(jī)放置在不同的位置，只有弱陽性質(zhì)控檢測為陽性，三份陰性質(zhì)控全部檢測為陰性，才視為在控，方可判定樣品的檢測結(jié)果，否則則為失控，應(yīng)及時(shí)分析原因，然后重新采樣、重復(fù)檢測。在質(zhì)控在控的條件下，同一份標(biāo)本中出現(xiàn)不同的檢測結(jié)果，也應(yīng)分析原因，必要時(shí)重新檢測樣本。自應(yīng)用PCR檢測病原以來，出現(xiàn)了諸多的核酸檢測試劑盒。不同廠家的試劑盒根據(jù)病毒基因的特異性序列設(shè)計(jì)的擴(kuò)增引物和探針，包含有不同的靶基因位點(diǎn)的試劑檢測靈敏度不同，特異性也不同，試劑中的酶和金屬離子的成分與質(zhì)量也存在差異，這些最終都將影響核酸的擴(kuò)增效率和檢測結(jié)果。如萬圣等2017年報(bào)道對三種禽流感病毒核酸檢測試劑盒比較，陽性檢出率分別為70.0%、45.0%和45.0%。因此，不合適的試劑勢必導(dǎo)致核酸提取失敗，影響核酸檢出率。因此，在進(jìn)行批量檢測前，一定要進(jìn)行試劑盒的比對試驗(yàn)，選擇靈敏度較高的試劑盒。眾所周知，RNA病毒容易在傳播中發(fā)生變異，目前現(xiàn)有的試劑盒主要是針對病毒基因組的保守序列進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，由于我們對病毒的認(rèn)知還存有一定的空白，病毒在進(jìn)化過程中其保守序列是否會(huì)發(fā)生突變還不清楚，核酸的檢測試劑也缺乏大規(guī)模的臨床驗(yàn)證，若病毒RNA的引物設(shè)計(jì)區(qū)發(fā)生了突變，可直接導(dǎo)致檢測結(jié)果不能呈現(xiàn)陽性。
1、提高采樣和檢測人員的理論素養(yǎng)和操作技能對采樣和檢測人員進(jìn)行系統(tǒng)的培訓(xùn)，使其在工作前能充分掌握獸醫(yī)專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)，對于常見病和多發(fā)病，了解其發(fā)病表現(xiàn)和病原的流行病學(xué)規(guī)律，這是準(zhǔn)確采集病料的基本條件。同時(shí)，還要進(jìn)行操作技能培訓(xùn)，尤其是樣本的采集方法，樣品的保存和運(yùn)輸要求，微生物的分離鑒定，核酸的檢測流程、血清學(xué)檢測方法等，正確規(guī)范的操作技能，不僅能有效防止感染性物質(zhì)的擴(kuò)散，保證樣品的質(zhì)量和檢測效果，還能防護(hù)個(gè)人安全。首選國家相關(guān)部門批準(zhǔn)的核酸檢測試劑盒，然后實(shí)驗(yàn)室對試劑盒檢測能力驗(yàn)證分析，挑選靈敏度高、特異性強(qiáng)的試劑盒，作為本實(shí)驗(yàn)室檢測購買的標(biāo)準(zhǔn)。另外，針對不同地區(qū)的發(fā)病情況，再一次篩選，選取適合病原微生物地方分型的檢測試劑，這樣盡可能的保證本實(shí)驗(yàn)室檢測的陽性率和可靠性。另外，要選擇合適的核酸質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，這些在檢測標(biāo)準(zhǔn)化和敏感性評價(jià)中發(fā)揮著重要的作用。眾所周知，相比于人類病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，動(dòng)物病毒核酸的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究明顯滯后?，F(xiàn)有的商品化病毒核酸檢測試劑盒中，作為質(zhì)控品的陽性對照多由廠家自行制備提供，缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量控制和量值標(biāo)定，限制了其監(jiān)控檢測的性能，也難以滿足不同試劑和不同實(shí)驗(yàn)室檢測能力評價(jià)的需求。縱觀目前動(dòng)物病毒核酸質(zhì)控品研制的特點(diǎn)和優(yōu)缺點(diǎn)分析，以噬菌體為基礎(chǔ)的內(nèi)嵌病毒樣顆粒與全病毒顆粒最接近，對動(dòng)物RNA病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究和應(yīng)用都有著較為廣闊的前景。3、規(guī)范和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)室核酸檢測的流程病毒核酸的檢測是疾病確診的關(guān)鍵步驟，采樣和檢測人員要充分做好生物安全防護(hù)的同時(shí)，必須要按照規(guī)范處理流程才能有效保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。首先檢測人員應(yīng)在安全防護(hù)的條件下從運(yùn)輸箱中取出樣本管，仔細(xì)核對采集的樣品信息，標(biāo)記和錄入相關(guān)的信息；然后注意樣本管外部消毒處理，病原的滅活；之后才能進(jìn)入二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相應(yīng)的操作，必須在生物安全柜內(nèi)打開樣品管，根據(jù)試劑盒要求進(jìn)行核酸的提取、擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析、結(jié)果審核等操作。樣品檢測完成后要立即進(jìn)行嚴(yán)格的終末消毒程序，如空氣、工作臺(tái)、地面、生物安全柜、樣品轉(zhuǎn)運(yùn)箱等嚴(yán)格徹底地消毒。4、優(yōu)化配置實(shí)驗(yàn)室檢測設(shè)備和人員在條件允許的情況下，實(shí)驗(yàn)室檢測區(qū)進(jìn)行合理的劃分，盡量確保專屋專用，儀器設(shè)備不共用，尤其是核酸檢測分析室。另外，優(yōu)化各項(xiàng)檢測人員的管理，每項(xiàng)檢測需有專門的人員負(fù)責(zé)，不交叉，不是本項(xiàng)檢測的人員不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室該項(xiàng)目檢測區(qū)域。5、制定規(guī)范的檢測結(jié)果解讀制度根據(jù)國家相關(guān)部門的綜合數(shù)據(jù)分析要求，進(jìn)一步制定本實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果解讀規(guī)范，撰寫疫病檢測尤其是核酸檢測、血清學(xué)檢測的操作規(guī)范，并組織培訓(xùn)實(shí)施。實(shí)驗(yàn)室制定嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)和消毒流程。樣本采集時(shí)和進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，務(wù)必采用相應(yīng)的生物安全防護(hù)等級(jí)方可進(jìn)入，如戴防護(hù)口罩、帽子、穿一次性隔離衣、防護(hù)服、防護(hù)靴套、戴護(hù)目鏡或面罩、戴雙層手套等。檢測工作結(jié)束后，在實(shí)驗(yàn)室相對緩沖間按規(guī)范流程脫掉防護(hù)裝備后再出實(shí)驗(yàn)室。工作人員離開實(shí)驗(yàn)室必須洗手和手消毒。相應(yīng)的防護(hù)裝備也應(yīng)按照相應(yīng)的消毒清洗流程，如：實(shí)驗(yàn)室空氣消毒，移動(dòng)式紫外燈消毒1h，走廊進(jìn)行紫外消毒30min；工作臺(tái)面消毒，每天實(shí)驗(yàn)后使用0.5%~1% 有效氯消毒臺(tái)面和地面；生物安全柜消毒，每天實(shí)驗(yàn)后用75%酒精對生物安全柜進(jìn)行擦拭，再開紫外燈消毒30min；轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒，轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器使用前后及時(shí)用 75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。近年來，盡管以核酸擴(kuò)增為基礎(chǔ)的分子檢測技術(shù)，以其具有快速、敏感、特異、定量準(zhǔn)確，并且對實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境要求低等特點(diǎn)，在動(dòng)物疫病病原的檢測中得到了廣泛的應(yīng)用，逐漸成為確診動(dòng)物疫病病原檢測的主要手段，但獸醫(yī)臨床的核酸檢測無法保證結(jié)果百分百準(zhǔn)確的現(xiàn)象，如同新冠病毒的核酸檢測，不能將其作為臨床診斷的唯一依據(jù)。在實(shí)際檢測時(shí)一定要結(jié)合患畜的臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)室檢查（血清學(xué)檢測等）進(jìn)行綜合分析、綜合診斷，提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確率。
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